A new approach to mark termites (Cornitermes cumulans (Kollar) Blattodea: Isoptera) for laboratory bioassays / Uma nova abordagem de marcador tópico em cupins para bioensaios de laboratório

Behavioral lab bioassays involving termites must be promptly performed to allow intended observations prior to death from dissecation, typical of these soft-bodied insects. To this end, topic markers have been proposed as an alternative to histological stains which, while not always toxic are inevitably lengthy to apply. Among recommended topic markers, gouache is easy to apply, dries out quickly, but it is known affect termites in the long run, being suitable only to short-term bioassays. Its alternative, colored glue, is also easy to apply, but it takes long to dry and it is too dense and heavy, being thus prone to affect termite walking patterns. Here we tested a mix of gouache and colored glue aiming to combine the qualities of both into a suitable topical marker for Cornitermes cumulans termites. Similar patterns of survival presented by marked and unmarked termites ruled out concerns about toxicity of this mixture. Such results were consistent across distinct group densities evidencing that the mixture does not interfere with, nor it is affected by, crowding effects. Because crowding regulates interindividual interactions and these underlie most behaviors, the mixture can be thought to be suitable to behavioral studies. We argue that this 1:2 glue:gouache mixture is an excellent alternative to mark termites for lab bioassays. Being atoxic, cheap, easy to apply, and non-invasive, this mixture may happen to be useful not only for termites but also in bioassaying other similarly soft-bodied insects.

Bioensaios comportamentais em laboratório com cupins devem ser realizados rapidamente a fim de garantir observações antes da morte por dissecação, típico desses insetos de corpo mole. Para este fim, marcadores tópicos têm sido propostos como uma alternativa para marcadores histológicos que, embora nem sempre tóxico, possuem uma aplicação demorada. Entre os marcadores tópicos recomendados, tinta guache é de fácil aplicação, rápida secagem, porém afeta os cupins em bioensaios longos, sendo adequado apenas para bioensaios curtos. Sua alternativa, cola colorida, também é de fácil aplicação mas leva muito tempo para secar e é muito denso e pesado, afetando os padrões de caminhamento dos cupins. No presente estudo, nós testamos uma mistura de tinta guache e cola colorida objetivando combinar as qualidades de ambos os marcadores tópicos em um marcador tópico adequado para Cornitermes cumulans. Padrões similares de sobrevivência entre cupins marcados e controle indicam a ausência de toxicidade na mistura de tinta guache e cola colorida. Tais resultados são consistentes em grupos de densidades distintas, o que comprova que a mistura não interfere, nem sofre efeitos de aglomeração. Uma vez que a aglomeração regula as interações inter-individuais e afetam a maioria dos comportamentos, a mistura pode ser adequada para estudos comportamentais. Nós argumentamos que a mistura de tinta guache e cola (1:2) é uma excelente alternativa como marcador tópico em cupins para bioensaios em laboratório. Sendo atóxico, barato, fácil de aplicar e não invasivo, esta mistura pode ser útil não só para os cupins, mas também em bioensaios com outros insetos de corpo mole.

A new approach to mark termites (Cornitermes cumulans (Kollar) Blattodea: Isoptera) for laboratory bioassays

Abstract Behavioral lab bioassays involving termites must be promptly performed to allow intended observations prior to death from dissecation, typical of these soft-bodied insects. To this end, topic markers have been proposed as an alternative to histological stains which, while not always toxic are inevitably lengthy to apply. Among recommended topic markers, gouache is easy to apply, dries out quickly, but it is known affect termites in the long run, being suitable only to short-term bioassays. Its alternative, colored glue, is also easy to apply, but it takes long to dry and it is too dense and heavy, being thus prone to affect termite walking patterns. Here we tested a mix of gouache and colored glue aiming to combine the qualities of both into a suitable topical marker for Cornitermes cumulans termites. Similar patterns of survival presented by marked and unmarked termites ruled out concerns about toxicity of this mixture. Such results were consistent across distinct group densities evidencing that the mixture does not interfere with, nor it is affected by, crowding effects. Because crowding regulates interindividual interactions and these underlie most behaviors, the mixture can be thought to be suitable to behavioral studies. We argue that this 1:2 glue:gouache mixture is an excellent alternative to mark termites for lab bioassays. Being atoxic, cheap, easy to apply, and non-invasive, this mixture may happen to be useful not only for termites but also in bioassaying other similarly soft-bodied insects.

Resumo Bioensaios comportamentais em laboratório com cupins devem ser realizados rapidamente a fim de garantir observações antes da morte por dissecação, típico desses insetos de corpo mole. Para este fim, marcadores tópicos têm sido propostos como uma alternativa para marcadores histológicos que, embora nem sempre tóxico, possuem uma aplicação demorada. Entre os marcadores tópicos recomendados, tinta guache é de fácil aplicação, rápida secagem, porém afeta os cupins em bioensaios longos, sendo adequado apenas para bioensaios curtos. Sua alternativa, cola colorida, também é de fácil aplicação mas leva muito tempo para secar e é muito denso e pesado, afetando os padrões de caminhamento dos cupins. No presente estudo, nós testamos uma mistura de tinta guache e cola colorida objetivando combinar as qualidades de ambos os marcadores tópicos em um marcador tópico adequado para Cornitermes cumulans. Padrões similares de sobrevivência entre cupins marcados e controle indicam a ausência de toxicidade na mistura de tinta guache e cola colorida. Tais resultados são consistentes em grupos de densidades distintas, o que comprova que a mistura não interfere, nem sofre efeitos de aglomeração. Uma vez que a aglomeração regula as interações inter-individuais e afetam a maioria dos comportamentos, a mistura pode ser adequada para estudos comportamentais. Nós argumentamos que a mistura de tinta guache e cola (1:2) é uma excelente alternativa como marcador tópico em cupins para bioensaios em laboratório. Sendo atóxico, barato, fácil de aplicar e não invasivo, esta mistura pode ser útil não só para os cupins, mas também em bioensaios com outros insetos de corpo mole.

A new approach to mark termites (Cornitermes cumulans (Kollar) Blattodea: Isoptera) for laboratory bioassays / Uma nova abordagem de marcador tópico em cupins para bioensaios de laboratório

Abstract Behavioral lab bioassays involving termites must be promptly performed to allow intended observations prior to death from dissecation, typical of these soft-bodied insects. To this end, topic markers have been proposed as an alternative to histological stains which, while not always toxic are inevitably lengthy to apply. Among recommended topic markers, gouache is easy to apply, dries out quickly, but it is known affect termites in the long run, being suitable only to short-term bioassays. Its alternative, colored glue, is also easy to apply, but it takes long to dry and it is too dense and heavy, being thus prone to affect termite walking patterns. Here we tested a mix of gouache and colored glue aiming to combine the qualities of both into a suitable topical marker for Cornitermes cumulans termites. Similar patterns of survival presented by marked and unmarked termites ruled out concerns about toxicity of this mixture. Such results were consistent across distinct group densities evidencing that the mixture does not interfere with, nor it is affected by, crowding effects. Because crowding regulates interindividual interactions and these underlie most behaviors, the mixture can be thought to be suitable to behavioral studies. We argue that this 1:2 glue:gouache mixture is an excellent alternative to mark termites for lab bioassays. Being atoxic, cheap, easy to apply, and non-invasive, this mixture may happen to be useful not only for termites but also in bioassaying other similarly soft-bodied insects.

Resumo Bioensaios comportamentais em laboratório com cupins devem ser realizados rapidamente a fim de garantir observações antes da morte por dissecação, típico desses insetos de corpo mole. Para este fim, marcadores tópicos têm sido propostos como uma alternativa para marcadores histológicos que, embora nem sempre tóxico, possuem uma aplicação demorada. Entre os marcadores tópicos recomendados, tinta guache é de fácil aplicação, rápida secagem, porém afeta os cupins em bioensaios longos, sendo adequado apenas para bioensaios curtos. Sua alternativa, cola colorida, também é de fácil aplicação mas leva muito tempo para secar e é muito denso e pesado, afetando os padrões de caminhamento dos cupins. No presente estudo, nós testamos uma mistura de tinta guache e cola colorida objetivando combinar as qualidades de ambos os marcadores tópicos em um marcador tópico adequado para Cornitermes cumulans. Padrões similares de sobrevivência entre cupins marcados e controle indicam a ausência de toxicidade na mistura de tinta guache e cola colorida. Tais resultados são consistentes em grupos de densidades distintas, o que comprova que a mistura não interfere, nem sofre efeitos de aglomeração. Uma vez que a aglomeração regula as interações inter-individuais e afetam a maioria dos comportamentos, a mistura pode ser adequada para estudos comportamentais. Nós argumentamos que a mistura de tinta guache e cola (1:2) é uma excelente alternativa como marcador tópico em cupins para bioensaios em laboratório. Sendo atóxico, barato, fácil de aplicar e não invasivo, esta mistura pode ser útil não só para os cupins, mas também em bioensaios com outros insetos de corpo mole.

Evaluation of Cuban Bacillus thuringiensis (Berliner, 1911) (Bacillales: Bacillacea) isolates with larvicidal activity against Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae)

Objective: To evaluate 11 Cuban native Bacillus (B.) thuringiensis isolates in order to select one with the best larvicidal activity against Aedes (Ae.) aegypti and low cytotoxicity. Methods: The cry and cyt genes of the isolates (A21, A51, L95, L910, M29, R84, R85, R87, R89, U81 and X48) were amplified by PCR. The influence of organic matter and NaCl on the larvicidal activity was tested by bioassays. Cytotoxicity was assayed on peritoneal macrophages of BALB/c mice. Results: The cyt1 (Aa, Ab, Ba), cyt2, cry4aA, cry4Ba, cry11 (Aa, Ba, Bb) and cry10 genes were identified in all native Cuban isolates. The larvicidal activity (LC90) of seven isolates was affected by the presence of organic matter in the water, while A21, A51, L910, R84, U81 and X48 had better LC50, LC90, LC95 than the 266/2 9-VI-98 control strain. The LC50 of two isolates was affected by the presence of NaCl and A21, A51, R85 isolate had better larvicidal activity than the 266/2 9-VI-98 control strain. In terms of toxicity against macrophages, the extracts of nine isolates were less cytotoxic than the control strains. Conclusions: Native isolate A21 had the main virulence factors against Ae. aegypti larvae, displayed a good larvicidal activity in presence of different factors related with Ae. aegypti breeding sites, and had low citotoxicity against macrophages. These results can contribute to the improvement of existing biological control strategies and the development of new biolarvicides.

EFECTO DEL pH EN LAS TASAS DE BIOACUMULACIÓN DE METALES PESADOS EN LA MACROALGA Bostrychia calliptera (Rhodomelaceae, Ceramiales) / Effect of pH on the bioacumulation rates of heavy metals in macroalgae Bostrychia calliptera (Rhodomelaceae, Ceramiales)

RESUMEN Uno de los factores que más influye en las características químicas de un metal en solución es el nivel de acidez. El pH, por lo tanto, afecta la reactividad del ion y por ende su interacción con los puntos de unión de la pared celular de la planta. Este estudio evaluó el efecto del pH en la capacidad de bioacumulación de metales pesados en el alga roja Bostrychia calliptera (Rhodophyta, Rhodomelaceae). Se sometieron talos del alga a diferentes concentraciones de mercurio (Hg) y Plomo (Pb), desde 0,1 hasta 10 mg/L para Hg y desde 0,1 hasta 15 mg/L para Pb, durante periodos exposición de 0, 12, 24 y 96 horas, bajo diferentes niveles de pH. Las concentraciones de metal acumulado se determinaron por espectrofotometría de absorción atómica. Las mayores tasas de acumulación se encontraron en el alga expuesta a pH 8 (tanto para Hg como para Pb), el cual es un nivel de pH muy cercano al medido en el área de muestreo. La concentración de metal en el alga se incrementó de manera lineal hasta las 48 h de exposición, tiempo en el que se evidenció una mayor eficiencia de acumulación durante el primer intervalo del periodo del bioensayo. El presente estudio permitió identificar el uso potencial del alga B. calliptera como especie bioindicadora de metales pesados en ambientes estuarinos.

ABSTRACT One of the factors with a bigger influence on the chemical characteristics of metal in solution is the level of acidity. Solution pH affects the cell wall metal-binding sites and the metal ion chemistry in water. This study evaluated the effect of pH on the bioaccumulation capacity in the red algae B. calliptera (Rhodophyta, Rhodomelaceae) exposed to different pH ranges. Algae thalli were subjected to different concentrations ofmercury (Hg) and Lead (Pb), at concentrations from 0.1 to 10 mg/L for Hg and from 0.1 to 15 mg/L for Pb, respectively, during the following exposure times: 0, 12, 24 and 96 hours for each ion. Metal concentrations were determined by atomic absorption spectrophotometry according to standard APHA methods. The highest accumulation rates were found when the algae were exposed to pH 8 (for both Hg and Pb), which is a level very close to that measured in the study area. The metal concentration in the algae increased linearly until 48 hrs, a time where a greater accumulation efficiency was evident. The present study allowed to identify the potential use of the alga B. calliptera as a bioindicator species for heavy metals in estuarine environments.

Susceptibility of field populations of Haematobia irritans to fipronil in Uruguay

ABSTRACT: Fipronil was registered in Uruguay in 1997, and, since then, it has been used for the control of Haematobia irritans irritans and Rhipicephalus microplus. The susceptibility of H. irritants to this drug has not been evaluated. Therefore, the goal of the present study was to evaluate the resistance of H. irritans to fipronil. Additionally, a survey was carried out with the farmers to evaluate the use of fipronil for H. irritans control in the ranches where the flies came from. For the bioassays, 31 field populations of H. irritans were exposed to 10 concentrations of fipronil (3.2-16.0g.cm2), and their LC50 values were calculated using probit analysis. A bioassay was performed with horn flies from the susceptible colony maintained at the USDA-ARS Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory for comparison and calculation of resistance ratios (RRs). All 31 field populations surveyed in the study were susceptible to fipronil, with resistance ratios ranging from 0.5 to 2.2. Four populations with RRs >1 did not differ significantly from the susceptible strain. A single population showed an RR >2.2. Overall, the survey shows that fipronil was mostly used for R. microplus control, and in only three ranches, which were free of R. microplus, was fipronil used for horn fly control. Seventeen farmers did not use fipronil at all in the last three years. It is concluded that, in Uruguay, field populations of horn flies remain susceptible to fipronil.

RESUMO: O fipronil foi registrado no Uruguai em 1997 e, desde então, tem sido utilizado no controle de Haematobia irritans irritans e Rhipicephalus microplus. O objetivo do presente estudo foi avaliar a susceptibilidade de populações de campo de H. irritans ao fipronil. Além disso, foi realizada uma pesquisa para avaliar a utilização de fipronil e as práticas de controle de H. irritans nas fazendas de onde provinham as moscas. Para os bioensaios, 31 populações de campo de H. irritans foram expostas a 10 concentrações de fipronil (3,2-16,0g.cm2), e seus valores de CL50 foram calculados usando análise probit. Um bioensaio foi realizado com H. irritans da colônia suscetível mantida no USDA-ARS Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory para comparação e cálculo das razões de resistência (RRs). Todas as 31 populações de campo pesquisadas no estudo eram suscetíveis ao fipronil, com taxas de resistência variando de 0,5 à 2,2. Quatro populações com Rrs >1 não diferiram significativamente da cepa suscetível. Uma única população apresentou RR >2,2. No geral, o fipronil tinha sido usado principalmente para o controle de R. microplus, e em apenas três fazendas, que estavam livres de R. microplus, o fipronil era utilizado para o controle da H. irritans. Em 17 fazendas não tinha sido utilizado fipronil nos últimos três anos. Conclui-se que no Uruguai as populações de H. irritans no campo permanecem suscetíveis ao fipronil.

Susceptibility of field populations of Haematobia irritans to fipronil in Uruguay / Suscetibilidade de populações de campo de Haematobia irritans ao fipronil no Uruguai

Fipronil was registered in Uruguay in 1997, and, since then, it has been used for the control of Haematobia irritans irritans and Rhipicephalus microplus. The susceptibility of H. irritants to this drug has not been evaluated. Therefore, the goal of the present study was to evaluate the resistance of H. irritans to fipronil. Additionally, a survey was carried out with the farmers to evaluate the use of fipronil for H. irritans control in the ranches where the flies came from. For the bioassays, 31 field populations of H. irritans were exposed to 10 concentrations of fipronil (3.2-16.0μg.cm2), and their LC50 values were calculated using probit analysis. A bioassay was performed with horn flies from the susceptible colony maintained at the USDA-ARS Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory for comparison and calculation of resistance ratios (RRs). All 31 field populations surveyed in the study were susceptible to fipronil, with resistance ratios ranging from <0.5 to 2.2. Four populations with RRs >1 did not differ significantly from the susceptible strain. A single population showed an RR >2.2. Overall, the survey shows that fipronil was mostly used for R. microplus control, and in only three ranches, which were free of R. microplus, was fipronil used for horn fly control. Seventeen farmers did not use fipronil at all in the last three years. It is concluded that, in Uruguay, field populations of horn flies remain susceptible to fipronil.(AU)

O fipronil foi registrado no Uruguai em 1997 e, desde então, tem sido utilizado no controle de Haematobia irritans irritans e Rhipicephalus microplus. O objetivo do presente estudo foi avaliar a susceptibilidade de populações de campo de H. irritans ao fipronil. Além disso, foi realizada uma pesquisa para avaliar a utilização de fipronil e as práticas de controle de H. irritans nas fazendas de onde provinham as moscas. Para os bioensaios, 31 populações de campo de H. irritans foram expostas a 10 concentrações de fipronil (3,2-16,0μg.cm2), e seus valores de CL50 foram calculados usando análise probit. Um bioensaio foi realizado com H. irritans da colônia suscetível mantida no USDA-ARS Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory para comparação e cálculo das razões de resistência (RRs). Todas as 31 populações de campo pesquisadas no estudo eram suscetíveis ao fipronil, com taxas de resistência variando de <0,5 à 2,2. Quatro populações com Rrs >1 não diferiram significativamente da cepa suscetível. Uma única população apresentou RR >2,2. No geral, o fipronil tinha sido usado principalmente para o controle de R. microplus, e em apenas três fazendas, que estavam livres de R. microplus, o fipronil era utilizado para o controle da H. irritans. Em 17 fazendas não tinha sido utilizado fipronil nos últimos três anos. Conclui-se que no Uruguai as populações de H. irritans no campo permanecem suscetíveis ao fipronil.(AU)

Standard culture of Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), for its use in toxicity bioassays / Cultura padrão de Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), para uso em bioensaios de toxicidade

Abstract The management and use of native species under laboratory conditions is the main difficult for species proposal for its use in bioassays. The present study showed the results about management under controlled conditions of Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), that is a parthenogenetic species with wide geographical distribution. It obtained its eggs from a pre Andean river from Araucania region (39° S), and it determined the conditions for larval rearing under artificial food, adults getting (manipulation), eggs (hatching sincronization) and larvae getting after hatching. The P.grimmii life cycle had larvae that late 23 days in get the pupa stage (stage I to IV), the adult within the next 48 hours deposits the eggs that hatched at 72 hours. It stablished laboratory conditions: incubation room temperature, water pH, and artificial feeding, photoperiod and larvae and eggs management techniques. In according to obtained results it managed all life cycles under laboratory conditions that can propose the use of this species as potential biological material for toxicity bioassays.

Resumo O manejo e o uso de espécies nativas em condições de laboratório são as principais dificuldades para a proposta de uso de espécies em bioensaios. O presente estudo mostrou os resultados acerca do manejo sob condições controladas de Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), espécie partenogenética com ampla distribuição geográfica. Foram obtidos seus ovos de um rio pré-andino da região de Araucanía (39º S) e determinadas as condições para criação de larvas sob alimentação artificial, obtenção de adultos (manipulação), de ovos (sincronização de eclosão) e de larvas após a eclosão. O ciclo de vida de P. grimmii teve larvas que, ao final dos 23 dias, atingiram o estágio de pupa (estágio I a IV). O adulto depositou nas 48 horas seguintes os ovos que eclodiram às 72 horas. Foram estabelecidas condições laboratoriais: temperatura da sala de incubação, pH da água e alimentação artificial, fotoperíodo e técnicas de manejo de larvas e ovos. De acordo com os resultados obtidos, foram gerenciados todos os ciclos de vida em condições de laboratório que podem propor o uso dessa espécie como material biológico potencial para bioensaios de toxicidade.

Efecto del cadmio sobre la mortalidad de adultos de Polydora sp. (Polychaeta: Spionidae) en el laboratorio

Introducción: Diversos estudios han demostrado el efecto del Cd sobre la mortalidad y otras respuestas fisiológicas de diversas especies de poliquetos. Objetivo: Evaluar el efecto tóxico del Cd en la mortalidad de adultos de Polydora sp. como especie prueba para estudios ecotoxicológicos. Métodos: Los especímenes fueron recolectados en el humedal costero Poza de la Arenilla, Callao, Peru. Los organismos fueron aclimatados durante dos semanas con agua de mar y sedimento y posteriormente, tres días en agua de mar, con 30 ‰ de salinidad y temperatura entre 20 a 22 °C. Los organismos se expusieron a las concentraciones nominales 75, 11.25, 1.69, 0.25; 0.04 mg/L de Cd y un control. Se analizaron tres réplicas de diez individuos por tratamiento durante 72 horas para registrar mortalidad. Se aplicaron las pruebas de Kruskal-Wallis y de U-Man Whitney para detectar las diferencias significativas entre tratamientos. Resultados: El efecto adverso del Cd sobre la mortalidad fue mucho más evidente en los tratamientos de 11.25 y 75 mg/L a partir de las primeras 24 horas de exposición. La concentración letal media de Cd a 72h fue de 2.59 mg/L. Conclusiones: La CL50 está en el mismo orden de magnitud de otras especies de poliquetos. Este es el primer estudio ecotoxicológico en Perú con poliquetos en condiciones de laboratorio. Se sugiere la utilización de Polydora sp. como especie prueba en experimentos de ecotoxicología, utilizando concentraciones nominales subletales de Cd que no superen los 1.6 mg/L para la observación de varias respuestas fisiológicas.

Introduction: Several studies have demonstrated the effect of Cd on mortality and other physiological responses of some polychaete species. Objective: To evaluate the toxic effect of Cd on adults mortality of Polydora sp as a test species for ecotoxicological studies. Methods: The specimens were collected in the coastal wetland of Poza de la Arenilla, Callao, Peru. The organisms were acclimatized for two weeks with seawater and sediment and then, three days in seawater, with 30 ‰ of salinity and temperature between 20 to 22 °C. The organisms were exposed to the nominal concentrations 75, 11.25, 1.69, 0.25; 0.04 mg/L of Cd and a control. Three replicates of ten individuals per treatment were analyzed for 72 hours to register mortality. The Kruskal-Wallis and U-Man Whitney tests were applied to detect significant differences among treatments. Results: The adverse effect of Cd on mortality was much more evident in the treatments of 11.25 and 75 mg/L after the first 24 hours of exposure. The mean lethal concentration of Cd at 72h was 2.59 mg/L. Conclusions: The LC50 is in the same order of magnitude as other polychaete species. This is the first ecotoxicological study in Peru using polychaetes under laboratory conditions. It is suggested the use of Polydora sp as a test species in ecotoxicology experiments, using nominal sublethal concentrations of Cd not exceeding 1.6 mg/L. for the observation of several physiological responses.

In vitro Antifungal Activity of Plant Extracts, Hydrolates and Essential Oils of Some Medicinal Plants and Control of Cucumber Anthracnose

Aims: This study is aimed to evaluate the in vitro antifungal activity effect of the crude aqueous extract (CAE), hydrolate (HY) and essential oil (EO) of Corymbia citriodora, Cymbopogon citratus, Cymbopogon flexuosus and Curcuma longa against the phytopathogenic fungi Alternaria steviae, Botryosphaeria dothidea, Colletotrichum gloeosporioides and Sclerotium rolfsii, and assess, in situ, the effectiveness of CAE of medicinal plants in reducing the severity of the cucumber anthracnose. Methodology: The EOs and HYs were obtained by hydrodistillation. The CAEs were prepared by the turbolysis method. Mycelial growth of the fungi was measured daily, by the diametrically opposite method. In the in vivo test, the CAEs were sprayed on the cotyledon leaves of healthy cucumber plants with three days after were inoculated with C. lagenarium. The severity of assessment of the disease was based on a scale of notes. Results: The medicinal plants studied showed antifungal activity against all or almost all pathogens. In general, treatment with CAE and HY of C. longa revealed the highest inhibition against the fungi tested. With the exception of the EO of C. longa, the other EOs showed total inhibition against all the fungi and in all the concentrations tested. Compared to control, in in vivo assays CAE of C. citratus presents a potential for control of cucumber anthracnose reducing the severity of the disease. Conclusion: The medicinal plants studied produce compounds associated with antimicrobial activity.

Effect of temperature and substrate moisture on group survival of Constrictotermes sp. (Isoptera: Termitidae) under laboratory conditions

ABSTRACT Laboratory bioassays should be performed under appropriate conditions that minimize stress and promote greater longevity to tested animals. For social insects, for instance, the stress triggered by removal individuals from nests may result in changes in their survival and behavior. Here we analyzed the effects of variations of different combinations of temperature and substrate moisture (mL of water/g of nest substrate) on group survival of Constrictotermes sp. (Termitidae: Nasutitermitinae). In general, lower substrate moisture resulted in faster mortality. On the other hand, groups survival longer at a temperature of 26 ºC and under higher substrate moisture (2-3 mL/7 g of nest substrate). The result of this study may contribute to the establishment of bioassay protocols performed with Constrictotermes sp. in the laboratory.

Carcinogenicity of smokeless tobacco: Evidence from studies in humans & experimental animals

A Working Group of the Monographs programme of the International Agency for Research on Cancer has classified smokeless tobacco as carcinogenic to humans (Group 1). This review article summarizes the data that support the evaluations of sufficient evidence in humans and in experimental animals for the carcinogenicity of smokeless tobacco whether used alone or with betel quid. It also identifies compounds of smokeless tobacco relevant to carcinogenicity (prominently tobacco-specific nitrosamines) and addiction (nicotine). The epidemiological evidence is summarized for oral cancer, other cancers associated with smokeless tobacco and oral potentially malignant lesions with a focus on analytical studies from the SEARO Region. Studies on cancer in experimental animals are summarized with a focus on studies applying smokeless tobacco products typical for the regions, such as mishri and naswar.

Effect of three diets in the experimental culture of the common snook ( Centropomus undecimalis Bloch, 1792) / Efecto de tres dietas en el cultivo experimental del róbalo ( Centropomus undecimalis Bloch, 1792)

ABSTRACT Objective. To evaluate the effect of three diets on the growth of juvenile common snook (Centropomus undecimalis) maintained in freshwater ponds. Materials and methods. 108 juvenile of common snook were homogenous and randomly distributed in a pond, divided into 9 corrals of 50 m2. Three diets were applied (D1: commercial food for trout, 45% protein; D2: commercial food for cobia, 50% protein and D3: fresh fish, 17.52% protein). The experimental treatments were assigned in triplicate and diets were supplied in two daily doses. Biometrics were performed every 20 days to assess: weight, size, Length-Weight correlation, Feed Conversion Factor (FCA), Condition Factor (K), Specific Growth Rate (SGR) and survival; during 120 days. The results were evaluated with a one-way ANOVA, when differences (p<0.05) were found the means were compared by test Median Mood, otherwise a pos-hoc test was performed (Tukey HSD). Results. Applying the test of Mood Median significant differences were found, showing the highest growth with D2, where values of SGR=0.65±0.09 g/day; FCA=3.76 and K=0.81±0.06. Survival was D1=51.4%, D2=50% and D3=77.8% without inferring statistically among the different diets. Conclusions. The culture of this species in freshwater ponds with commercial food for cobia, is viable in terms of growth and weight gain.

RESUMEN Objetivo. Evaluar el efecto de tres dietas sobre el desempeño de juveniles de róbalo (Centropomus undecimalis) mantenidos en estanques de agua dulce. Materiales y métodos. 108 juveniles de róbalo fueron distribuidos homogénea y aleatoriamente en un estanque dividido en 9 corrales de 50 m2. Se suministraron tres dietas (D1: alimento comercial para truchas, 45% de proteína; D2: alimento comercial para cobia, 50% de proteína y D3: pescado fresco, 17.52% de proteína). Los tratamientos experimentales fueron asignados por triplicado y se les suministró cada dieta en dos dosis diarias. Se realizaron biometrías cada 20 días evaluando: peso, talla, relación Longitud-Peso, Factor de Conversión Alimenticia (FCA), Factor de Condición (K), Tasa Específica de Crecimiento (SGR) y supervivencia final; durante 120 días. Los resultados fueron evaluados con un ANOVA a una vía, cuando no se encontraron diferencias (p>0.05) las medias fueron comparadas mediante la prueba de la Mediana de Mood. En caso de significación estadística del ANOVA, se aplicó la prueba de comparación múltiple de Tukey HSD. Resultados. Se encontraron diferencias estadísticas entre los tratamientos, mostrando los mayores crecimientos y rendimientos con D2, con valores de SGR=0.65±0.09 g/día; FCA=3.76 y K=0.81±0.06. La supervivencia fue D1=51.4%, D2=50% y D3=77.8% sin diferir estadísticamente entre las diferentes dietas. Conclusiones. El cultivo de esta especie en estanques de agua dulce con suministro de alimento comercial para cobia es viable en términos de crecimiento y ganancia en peso.

Sensitivity of two isolates of Phakopsora pachyrhizi to dithiocarmamate, chloronitril, triazoles, strobilurins, and carboxamides fungicides / Sensibilidade de Phakopsora pachyrhizi aos fungicidas ditiocarbamatos, cloronitrilas, triazóis, estrobilurinas e carboxamidas

Asian soybean rust (ASR), caused by the phytopathogen Phakopsora pachyrhizi Sydow & Sydow, is a worldwide distributed fungal disease responsible for causing damages in soybean crops [Glycine max (L.) Merril] of up to 90% of its productive potential. So far, due to limited availability of resistant varieties, fungicide application is the most widely used strategy for ASR control, although some populations of the pathogen have shown reduced sensitivity to certain active ingredients. Several methods have been described to measure the sensitivity of a fungus to a given fungicide, or even the fungitoxicity of a chemical. The most used tests are spore germination in wateragar medium and evaluation of disease severity in detached soybean leaves. Experiments were carried out with Brazilian populations of the pathogen: one from Uberlândia - MG and the other from Chapadão do Sul - MS, following the mentioned methodologies. The results showed the reduction of benzovindiflupyr efficiency in relation to spore germination and disease severity for the MS population, as also did fluxapyroxad, cyproconazole, and tebuconazole. Multisite fungicides (chlorothalonil, copper oxychloride, and mancozeb) may be used in the management of ASR resistance in the fields of Brazil associated with strobilurins, triazoles, and carboxamides. The efficiency of the main active ingredient tested depends on the formulation and others molecules used in the commercial product.

A ferrugem asiática da soja (FAS), causada pelo fitopatógeno Phakopsora pachyrhizi Sydow & Sydow, é uma doença fúngica distribuída mundialmente e responsável por causar danos na cultura da soja [Glycine max (L.) Merril], em até 90% do potencial produtivo. Até agora, devido à limitada disponibilidade de variedades resistentes, a aplicação de fungicida é a estratégia mais utilizada para controlar a FAS, embora algumas populações do patógeno tenham demonstrado menor sensibilidade a determinados ingredientes ativos. Vários métodos foram descritos para medir a sensibilidade de um fungo a um dado fungicida, ou para monitorar sua redução ou perda de eficácia, ou mesmo a fungitoxicidade de um produto químico. Os testes mais utilizados são a germinação de esporos in vitro e a severidade da doença (%) em folhas de soja destacadas. Baseando-se nessas metodologias, foram realizados ensaios com populações do patógeno oriundas de Uberlândia - MG e do Chapadão do Sul - MS. Os resultados mostraram a redução da eficiência de benzovindiflupyr em relação à germinação e à severidade de doença para a população de Chapadão do Sul - MS. O mesmo comportamento foi obtido para os ingredientes ativos fluxapyroxad, cyproconazole e tebuconazole. Os fungicidas multissítios (clorotalonil, oxicloreto de cobre e mancozeb) podem ser utilizados no manejo da resistência à FAS nas lavouras do Brasil associados às estrobilurinas, triazóis e carboxamidas. A eficiência do principal ingrediente ativo estudado depende dos outros ingredientes ativos ou fungicidas associados na formulação comercial.

Phytotoxicity and cytotoxicity of Lepidaploa rufogrisea (Asteraceae) extracts in the plant model Lactuca sativa (Asteraceae) / Fitotoxicidad y citotoxicidad de los extractos de Lepidaploa rufogrisea (Asteraceae) en la planta modelo Lactuca sativa (Asteraceae)

AbstractLepidaploa rufogrisea is a promising candidate in the search of natural herbicides, with compounds (sesquiterpene lactones-glaucolide B) which have been reported to present phytotoxic potential against weeds. Thus, this work aimed to accomplish the phytochemical investigation of L. rufogrisea as well as the evaluation of its biological effects on the plant model Lactuca sativa. To this end, different extracts (aqueous, hydroalcoholic and hexane) of L. rufogrisea at different concentrations [0.25, 0.5, 1.0, 2.0 and 4.0 % (m/v)] were evaluated from macroscopic (percentage of germinated seeds, germination speed index and root length) and microscopic analysis (mitotic index and cell cycle alterations) in plantlets (150 per treatment) and meristematic cells (10 000 per treatment) of L. sativa var. Cristina. The extracts decreased the germination speed index and also the root growth of L. sativa plantlets. Cell proliferation was not significantly affected by the extracts. However, some chromosome and nuclear alterations in the mitotic spindle were observed, due to the interference of allelochemicals present in L. rufogrisea. Moreover, the plant model L. sativa demonstrated to be efficient for this kind of studies.

ResumenLepidaploa rufogrisea es una candidata prometedora en la búsqueda de herbicidas naturales, con compuestos (lactano sesquiterpeno- glaucolíde B) los cuales han sido reportados por presentar un potencial fitotóxico contra las malas hierbas. Por lo tanto, este trabajo tuvo como objetivo lograr la investigación fitoquímica de L. rufogrisea, así como también la evaluación de sus efectos biológicos sobre el modelo de planta Lactuca sativa L. Para esto, diferentes extractos (acuosos, hidroalcohólicos y hexanos) de L. rufogrisea fueron evaluados. El porcentaje de semillas germinadas, el índice de velocidad de germinación y la longitud de raíz de plántulas de L. sativa var. Cristina fueron evaluadas, así como también la citotoxicidad de los extractos en las células meristemáticas. Los extractos disminuyeron el índice de velocidad de germinación y también el crecimiento de las raíces de las plántulas de L. sativa. La proliferación celular no se vio significativamente afectada por los extractos. Sin embargo, se observaron alteraciones cromosómicas y nucleares, debido a la interferencia de los aleloquímicos presentes en L. rufogrisea en el huso mitótico. Además, el modelo de planta L. sativa demostró ser eficiente para tales estudios.

Standard culture of Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), for its use in toxicity bioassays

Abstract The management and use of native species under laboratory conditions is the main difficult for species proposal for its use in bioassays. The present study showed the results about management under controlled conditions of Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), that is a parthenogenetic species with wide geographical distribution. It obtained its eggs from a pre Andean river from Araucania region (39° S), and it determined the conditions for larval rearing under artificial food, adults getting (manipulation), eggs (hatching sincronization) and larvae getting after hatching. The P.grimmii life cycle had larvae that late 23 days in get the pupa stage (stage I to IV), the adult within the next 48 hours deposits the eggs that hatched at 72 hours. It stablished laboratory conditions: incubation room temperature, water pH, and artificial feeding, photoperiod and larvae and eggs management techniques. In according to obtained results it managed all life cycles under laboratory conditions that can propose the use of this species as potential biological material for toxicity bioassays.

Resumo O manejo e o uso de espécies nativas em condições de laboratório são as principais dificuldades para a proposta de uso de espécies em bioensaios. O presente estudo mostrou os resultados acerca do manejo sob condições controladas de Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), espécie partenogenética com ampla distribuição geográfica. Foram obtidos seus ovos de um rio pré-andino da região de Araucanía (39º S) e determinadas as condições para criação de larvas sob alimentação artificial, obtenção de adultos (manipulação), de ovos (sincronização de eclosão) e de larvas após a eclosão. O ciclo de vida de P. grimmii teve larvas que, ao final dos 23 dias, atingiram o estágio de pupa (estágio I a IV). O adulto depositou nas 48 horas seguintes os ovos que eclodiram às 72 horas. Foram estabelecidas condições laboratoriais: temperatura da sala de incubação, pH da água e alimentação artificial, fotoperíodo e técnicas de manejo de larvas e ovos. De acordo com os resultados obtidos, foram gerenciados todos os ciclos de vida em condições de laboratório que podem propor o uso dessa espécie como material biológico potencial para bioensaios de toxicidade.

Bioensaios ecotoxicológicos na bacia hidrográfica do Rio Pardo (UGRHI 04), Brasil / Ecotoxicological bioassays in the Pardo River Hydrographic Basin (UGRHI 04), Brazil

A água é um importante recurso natural que contribui para melhorias no bem-estar social e desenvolvimento inclusivo. A presença de produtos químicos, rejeitos radioativos e agentes infecciosos pode comprometer a qualidade desse recurso, afetando a biodiversidade e a subsistência de milhões de pessoas. A Ecotoxicologia Aquática é uma ciência que surgiu para dar suporte no enfrentamento dos problemas de contaminação dos corpos d'água por compostos tóxicos. Seus instrumentos de análise são capazes de avaliar a toxicidade de compostos químicos, sinalizando os potenciais efeitos ecotoxicológicos e seus mecanismos de ação em organismos vivos em ambientes impactados. A Bacia Hidrográfica do Rio Pardo (UGRHI 04) abrange 27 municípios com um importante contingente populacional (1.092.477 habitantes), inserido em uma região cuja prática agrícola baseia-se na cultura de cana-de-açúcar para a produção de etanol e açúcar. Dentro desse contexto, o objetivo do estudo foi avaliar a toxicidade para organismos bioindicadores de amostras de água superficial do Rio Pardo, principal afluente da Bacia Hidrográfica do Rio Pardo. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda com Daphnia similis e Vibrio fischeri, e toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia. Adicionalmente, analisaram-se Oxigênio Dissolvido (OD), pH e Temperatura da água. Os resultados obtidos mostraram que, os parâmetros físico-químicos analisados estão de acordo com os limites estabelecidos pela Resolução CONAMA 357/2005 [OD (>= 5 mgO2/L); pH (6 a 9)]. Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Daphnia similis, tanto na estação chuvosa quanto na estação seca, não observou-se toxicidade sobre os organismos testados. Todas as amostras foram classificadas como Não Tóxicas (NT). Nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, na estação chuvosa, nenhuma das amostras analisadas apresentou toxicidade. Das amostras analisadas na estação seca, 50% apresentaram Efeito Crônico (EC); os resultados mostraram diferença estatisticamente significante entre o número médio de neonatos produzidos por adulta no grupo controle (19,2) e nas amostras dos pontos de coleta 2 (10,7), 3 (10,5) e 5 (8,1). No entanto, não houve diferença estatisticamente significante nas amostras dos pontos de coleta 1 (13,7), 4 (12,3) e 6 (14,3), classificadas como NT. A comparação entre os resultados obtidos no presente estudo, nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, mostrou similaridade com a série histórica de dados (2010-2015) fornecida pela Agência Ambiental do Governo do Estado de São Paulo (CETESB). Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Vibrio fischeri, nas estações chuvosa e seca do ano de 2016, não observou-se toxicidade sobre a bactéria após os períodos de 5 e 15 minutos de exposição; todas as amostras foram classificadas como NT. Apesar do Rio Pardo estar inserido em área com reconhecido uso de produtos agrícolas e pouca proteção de Áreas de Preservação Permanente (APP), os resultados mostraram toxicidade apenas para o organismo Ceriodaphnia dubia, na estação seca do ano de 2016, possivelmente relacionada com a diminuição da vazão média e a concentração de poluentes na água. Cabe destacar a importância da manutenção do monitoramento periódico pela CETESB, considerando o Art. 14 da Resolução CONAMA 357/2005, que prevê a "não verificação de efeito tóxico crônico a organismos" para águas doces de Classe 1 e 2 no contexto brasileiro

Water is an important natural resource that contributes to improvements in social well-being and inclusive development. The presence of chemicals, radioactive waste and infectious agents can compromise the quality of this resource, affecting the biodiversity and livelihoods of millions of people. Aquatic Ecotoxicology is a science that has emerged to support the problems of contamination of water bodies by toxic compounds. Its analytical instruments are able to evaluate the toxicity of chemical compounds, signaling the potential ecotoxicological effects and their mechanisms of action in living organisms in impacted environments. The Pardo River Hydrographic Basin (UGRHI 04) covers 27 municipalities with a significant population (1.092.477 inhabitants), inserted in a region whose agricultural practice is based on the cultivation of sugarcane for the production of ethanol and sugar. In this context, the objective of the study was to evaluate the toxicity to bioindicators organisms of surface water samples of the Pardo River, main tributary of the the Pardo River Hydrographic Basin. Acute toxicity tests were performed with Daphnia similis and Vibrio fischeri, and chronic toxicity with Ceriodaphnia dubia. In addition, dissolved oxygen (DO), pH and water temperature were analyzed. The obtained results showed that the physical-chemical parameters analyzed are in accordance with the limits established by CONAMA Resolution 357/2005 [DO (>= 5 mgO2 / L); pH (6 to 9)]. In the acute toxicity tests performed with Daphnia similis, both in rainy season and in dry season, no toxicity was observed on the organisms tested. All samples were classified as Non-Toxic (NT). In the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia in the rainy season none of the analyzed samples presented toxicity. Of the samples analyzed in the dry season, 50% presented Chronic Effect (CE); The results showed a statistically significant difference between the mean number of neonates produced by the adult in the control group (19,2) and the collection points 2 (10,7), 3 (10,5) and 5 (8,1). However, there was no statistically significant difference in the samples from collection points 1 (13,7), 4 (12,3) and 6 (14,3), classified as NT. The comparison between the results obtained in the present study in the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia showed similarity with the historical data series (2010-2015) provided by the Environmental Agency of the State of São Paulo (CETESB). In the acute toxicity tests performed with Vibrio fischeri in the rainy and dry seasons of 2016, no toxicity was observed on the bacteria after periods of 5 and 15 minutes of exposure; All samples were classified as NT. Although Rio Pardo is inserted in an area with recognized use of agricultural products and little protection from Permanent Preservation Areas (PPA), the results showed toxicity only for the Ceriodaphnia dubia organismo, in the dry season of 2016, possibly related to the decrease in average flow and the concentration of pollutants in the water. It is important to highlight the importance of Maintenance of periodic monitoring by CETESB, considering Art. 14 of CONAMA Resolution 357/2005, which provides for "non-verification of chronic toxic effect to organisms" for Class 1 and 2 fresh waters in the Brazilian context

Bioensaios ecotoxicológicos na bacia hidrográfica do Rio Pardo (UGRHI 04), Brasil / Ecotoxicological bioassays in the Pardo River Hydrographic Basin (UGRHI 04), Brazil

A água é um importante recurso natural que contribui para melhorias no bem-estar social e desenvolvimento inclusivo. A presença de produtos químicos, rejeitos radioativos e agentes infecciosos pode comprometer a qualidade desse recurso, afetando a biodiversidade e a subsistência de milhões de pessoas. A Ecotoxicologia Aquática é uma ciência que surgiu para dar suporte no enfrentamento dos problemas de contaminação dos corpos d'água por compostos tóxicos. Seus instrumentos de análise são capazes de avaliar a toxicidade de compostos químicos, sinalizando os potenciais efeitos ecotoxicológicos e seus mecanismos de ação em organismos vivos em ambientes impactados. A Bacia Hidrográfica do Rio Pardo (UGRHI 04) abrange 27 municípios com um importante contingente populacional (1.092.477 habitantes), inserido em uma região cuja prática agrícola baseia-se na cultura de cana-de-açúcar para a produção de etanol e açúcar. Dentro desse contexto, o objetivo do estudo foi avaliar a toxicidade para organismos bioindicadores de amostras de água superficial do Rio Pardo, principal afluente da Bacia Hidrográfica do Rio Pardo. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda com Daphnia similis e Vibrio fischeri, e toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia. Adicionalmente, analisaram-se Oxigênio Dissolvido (OD), pH e Temperatura da água. Os resultados obtidos mostraram que, os parâmetros físico-químicos analisados estão de acordo com os limites estabelecidos pela Resolução CONAMA 357/2005 [OD (>= 5 mgO2/L); pH (6 a 9)]. Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Daphnia similis, tanto na estação chuvosa quanto na estação seca, não observou-se toxicidade sobre os organismos testados. Todas as amostras foram classificadas como Não Tóxicas (NT). Nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, na estação chuvosa, nenhuma das amostras analisadas apresentou toxicidade. Das amostras analisadas na estação seca, 50% apresentaram Efeito Crônico (EC); os resultados mostraram diferença estatisticamente significante entre o número médio de neonatos produzidos por adulta no grupo controle (19,2) e nas amostras dos pontos de coleta 2 (10,7), 3 (10,5) e 5 (8,1). No entanto, não houve diferença estatisticamente significante nas amostras dos pontos de coleta 1 (13,7), 4 (12,3) e 6 (14,3), classificadas como NT. A comparação entre os resultados obtidos no presente estudo, nos ensaios de toxicidade crônica com Ceriodaphnia dubia, mostrou similaridade com a série histórica de dados (2010-2015) fornecida pela Agência Ambiental do Governo do Estado de São Paulo (CETESB). Nos ensaios de toxicidade aguda realizados com Vibrio fischeri, nas estações chuvosa e seca do ano de 2016, não observou-se toxicidade sobre a bactéria após os períodos de 5 e 15 minutos de exposição; todas as amostras foram classificadas como NT. Apesar do Rio Pardo estar inserido em área com reconhecido uso de produtos agrícolas e pouca proteção de Áreas de Preservação Permanente (APP), os resultados mostraram toxicidade apenas para o organismo Ceriodaphnia dubia, na estação seca do ano de 2016, possivelmente relacionada com a diminuição da vazão média e a concentração de poluentes na água. Cabe destacar a importância da manutenção do monitoramento periódico pela CETESB, considerando o Art. 14 da Resolução CONAMA 357/2005, que prevê a "não verificação de efeito tóxico crônico a organismos" para águas doces de Classe 1 e 2 no contexto brasileiro

Water is an important natural resource that contributes to improvements in social well-being and inclusive development. The presence of chemicals, radioactive waste and infectious agents can compromise the quality of this resource, affecting the biodiversity and livelihoods of millions of people. Aquatic Ecotoxicology is a science that has emerged to support the problems of contamination of water bodies by toxic compounds. Its analytical instruments are able to evaluate the toxicity of chemical compounds, signaling the potential ecotoxicological effects and their mechanisms of action in living organisms in impacted environments. The Pardo River Hydrographic Basin (UGRHI 04) covers 27 municipalities with a significant population (1.092.477 inhabitants), inserted in a region whose agricultural practice is based on the cultivation of sugarcane for the production of ethanol and sugar. In this context, the objective of the study was to evaluate the toxicity to bioindicators organisms of surface water samples of the Pardo River, main tributary of the the Pardo River Hydrographic Basin. Acute toxicity tests were performed with Daphnia similis and Vibrio fischeri, and chronic toxicity with Ceriodaphnia dubia. In addition, dissolved oxygen (DO), pH and water temperature were analyzed. The obtained results showed that the physical-chemical parameters analyzed are in accordance with the limits established by CONAMA Resolution 357/2005 [DO (>= 5 mgO2 / L); pH (6 to 9)]. In the acute toxicity tests performed with Daphnia similis, both in rainy season and in dry season, no toxicity was observed on the organisms tested. All samples were classified as Non-Toxic (NT). In the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia in the rainy season none of the analyzed samples presented toxicity. Of the samples analyzed in the dry season, 50% presented Chronic Effect (CE); The results showed a statistically significant difference between the mean number of neonates produced by the adult in the control group (19,2) and the collection points 2 (10,7), 3 (10,5) and 5 (8,1). However, there was no statistically significant difference in the samples from collection points 1 (13,7), 4 (12,3) and 6 (14,3), classified as NT. The comparison between the results obtained in the present study in the chronic toxicity tests with Ceriodaphnia dubia showed similarity with the historical data series (2010-2015) provided by the Environmental Agency of the State of São Paulo (CETESB). In the acute toxicity tests performed with Vibrio fischeri in the rainy and dry seasons of 2016, no toxicity was observed on the bacteria after periods of 5 and 15 minutes of exposure; All samples were classified as NT. Although Rio Pardo is inserted in an area with recognized use of agricultural products and little protection from Permanent Preservation Areas (PPA), the results showed toxicity only for the Ceriodaphnia dubia organismo, in the dry season of 2016, possibly related to the decrease in average flow and the concentration of pollutants in the water. It is important to highlight the importance of Maintenance of periodic monitoring by CETESB, considering Art. 14 of CONAMA Resolution 357/2005, which provides for "non-verification of chronic toxic effect to organisms" for Class 1 and 2 fresh waters in the Brazilian context

Walking stability of Rhyzopertha dominica (Fabricius, 1792) (Coleoptera: Bostrichidae) / Estabilidade de caminhamento de Rhyzopertha dominica (Fabricius, 1792) (Coleoptera: Bostrichidae)

Abstract Results obtained in studies can contribute to the advancement of science and innovative methods and techniques for developing practical activities. Reporting conditions that may restrict the implementation of research is critical to ensure the optimal development of further technical studies. The objective of this study was to assess the walking stability of R. dominica on a flat and smooth surface. The study was based on the determination of mortality, morphology and walking stability of the insect outside the grain mass, on a flat and smooth surface. Mortality of adults of this Coleoptera in conditions with and without food was similar, which explains the difficulty that this insect had for accessing the food source on the flat and smooth surface. The measurements of body length (BOL), width (BOW) and height (BOH) of R. dominica were compared with those of Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae), which showed good ability to walk in these conditions. This study indicated that the former presents lower BOL and BOW, and greater BOH than the second, and all these variables showed differences when analyzed simultaneously by means of the construction of multivariate morphometric indices (Width × Height, Length × Height and Height × Length × Width). These morphometric variables, together with the definition of the geometry most similar to the body shape, resulted in determination of the center of gravity (CG) and static rollover threshold (SRTgeom) for both species. Rhyzopertha dominica and T. castaneum presented CGs considered high and low, respectively, and together with the values obtained for SRTgeom, may justify that R. dominica can be considered a less stable species during movement, and presents greater risk of rollover on flat and smooth surfaces.

Resumo Resultados obtidos em pesquisas podem contribuir com o avanço da ciência e inovar métodos e técnicas para o desenvolvimento de atividades práticas. Relatar condições que podem restringir à execução de pesquisas é fundamental para garantir que seja observada a técnica ideal para o desenvolvimento de estudos posteriores. O objetivo deste trabalho foi estudar a estabilidade de caminhamento de R. dominica em superfície plana e polida. O estudo se baseou na determinação da mortalidade, morfologia e estabilidade de caminhamento do inseto fora da massa de grãos, em superfície plana e polida. A mortalidade dos adultos desse Coleoptera nas condições com e sem alimento foram semelhantes, o que justifica a dificuldade que esse inseto tem em acessar a fonte alimentar andando em superfície plana e polida. As medidas obtidas do comprimento (BOL), largura (BOW) e altura (BOH) do corpo de R. dominica foram comparadas com as de Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae), que pode ser considerado um bom caminhador nessas condições. Esse estudo mostrou que o primeiro é menor no BOL e BOW, e maior BOH que o segundo, e que, todas essas variáveis apresentaram diferenças quando analisadas simultaneamente por meio da construção de índices morfométricos multivariados (Largura × Altura; Comprimento × Altura e Altura × Comprimento × Largura). Essas variáveis morfométricas, juntamente com a definição da forma geométrica que mais se aproxima do formato corporal, proporcionaram a determinação do centro de gravidade (CG) e do limite lateral de tombamento (SRTgeom) para ambas as espécie. Rhyzopertha dominica e T. castaneum apresentaram CGs considerados alto e baixo, respectivamente, e juntamente com os valores obtidos para os SRTgeom, podem justificar que R. dominica pode ser considerada uma espécie menos estável durante o caminhamento, e que, apresenta maiores riscos de tombamento em superfícies plana e polida.

Contrasting patterns of insecticide resistance and knockdown resistance (kdr) in Aedes aegypti populations from Jacarezinho (Brazil) after a Dengue Outbreak

ABSTRACT After a dengue outbreak, the knowledge on the extent, distribution and mechanisms of insecticide resistance is essential for successful insecticide-based dengue control interventions. Therefore, we evaluated the potential changes to insecticide resistance in natural Aedes aegypti populations to Organophosphates (OP) and Pyrethroids (PY) after chemical vector control interventions. After a Dengue outbreak in 2010, A. aegypti mosquitoes from the urban area of Jacarezinho (Paraná, Brazil) were collected in 2011 and 2012. Insecticide resistance to OP Temephos was assessed in 2011 and 2012 by dose–response bioassays adopting WHO-based protocols. Additionally, in both sampling, PY resistance was also investigated by the Val1016Ile mutation genotyping. In 2011, a random collection of mosquitoes was carried out; while in 2012, the urban area was divided into four regions where mosquitoes were sampled randomly. Bioassays conducted with larvae in 2011 (82 ± 10%; RR95 = 3.6) and 2012 (95 ± 3%; RR95 = 2.5) indicated an incipient altered susceptibility to Temephos. On the other hand, the Val1016IIe mutation analysis in 2011, presented frequencies of the 1016Ilekdr allele equal to 80%. Nevertheless, in 2012, when the urban area of Jacarezinho was analyzed as a single unit, the frequency of the mutant allele was 70%. Additionally, the distribution analysis of the Val1016Ile mutation in 2012 showed the mutant allele frequencies ≥60% in all regions. These outcomes indicated the necessity of developing alternative strategies such as insecticide rotations for delaying the evolution of resistance.